高通量菌種篩選優(yōu)化系統(tǒng)主要用于通過高效的自動(dòng)化方法篩選和優(yōu)化微生物菌株，尤其是在工業(yè)微生物發(fā)酵、藥物生產(chǎn)、環(huán)境治理等領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛。篩選菌株的方法通常基于以下幾個(gè)方面的技術(shù)：
1.培養(yǎng)基篩選
選擇合適的培養(yǎng)基：菌株的篩選通常需要選擇不同的培養(yǎng)基來促進(jìn)目標(biāo)微生物的生長和產(chǎn)物的產(chǎn)生。不同的培養(yǎng)基成分會(huì)影響菌株的代謝產(chǎn)物，因此需要根據(jù)目標(biāo)產(chǎn)品或目標(biāo)功能設(shè)計(jì)特定的培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基優(yōu)化：通過調(diào)整培養(yǎng)基中的碳源、氮源、礦物質(zhì)和pH值等，可以優(yōu)化菌株的代謝產(chǎn)物生產(chǎn)能力。
2.高通量篩選技術(shù)
高通量篩選技術(shù)（HTS）允許在較短時(shí)間內(nèi)并行檢測大量菌株的特性。常見的高通量篩選方法包括：
微孔板法：使用96孔、384孔或更高通量的微孔板，快速篩選多種菌株的生長、產(chǎn)物合成等表現(xiàn)。
液體培養(yǎng)物檢測：通過自動(dòng)化液體處理系統(tǒng)，自動(dòng)測量菌株的生長速率、代謝產(chǎn)物濃度等信息，篩選出具有最佳表現(xiàn)的菌株。
熒光探針法：使用熒光標(biāo)記物或染料，通過檢測菌株生長或代謝產(chǎn)物的變化來快速篩選優(yōu)良菌株。
自動(dòng)化顯微鏡法：結(jié)合圖像分析技術(shù)，利用自動(dòng)顯微鏡掃描和菌落形態(tài)分析，從大規(guī)模樣本中篩選出最佳的菌株。
3.基因組篩選
基因編輯：利用CRISPR/Cas9等基因編輯工具對(duì)微生物基因組進(jìn)行定向改造，以提升目標(biāo)產(chǎn)品的生產(chǎn)能力或優(yōu)化特定的代謝路徑。
全基因組掃描：通過基因組測序和分析，篩選具有潛力的菌株，重點(diǎn)關(guān)注那些具有優(yōu)勢(shì)的代謝基因或耐受基因。
轉(zhuǎn)錄組分析：通過RNA-seq分析菌株的基因表達(dá)譜，篩選出在目標(biāo)代謝途徑上表現(xiàn)出高效活性的菌株。
4.代謝產(chǎn)物篩選
色譜分析法：使用高效液相色譜（HPLC）、氣相色譜（GC）、薄層色譜（TLC）等技術(shù)，檢測菌株在特定培養(yǎng)條件下的代謝產(chǎn)物，篩選出具有較高代謝產(chǎn)物產(chǎn)生能力的菌株。
質(zhì)譜分析法（MS）：結(jié)合質(zhì)譜分析，進(jìn)行菌株代謝物的定量和定性分析，進(jìn)一步篩選出具有較高產(chǎn)量的菌株。
5.抗性篩選
抗藥性測試：對(duì)于特定的抗性篩選，如抗生素抗性或重金屬耐受性，可以通過抗藥性板或液體培養(yǎng)進(jìn)行高通量篩選，找到那些適應(yīng)特殊環(huán)境條件的菌株。
環(huán)境適應(yīng)性篩選：某些工業(yè)發(fā)酵過程中，菌株可能需要在特定的環(huán)境條件下工作，如高溫、低pH或高鹽環(huán)境。通過在這些極端條件下篩選，可以找到適應(yīng)性的菌株。
6.酶活性篩選
酶活性檢測：如果目標(biāo)菌株產(chǎn)生某種酶，可以使用適當(dāng)?shù)牡孜飦頇z測酶活性，例如用色素底物來測定酶的催化反應(yīng)。此方法能夠快速篩選出具有高酶活性的菌株。
熒光酶標(biāo)法：利用熒光標(biāo)記底物和檢測系統(tǒng)，通過熒光變化檢測酶的活性，篩選出表現(xiàn)優(yōu)異的菌株。
7.綜合篩選
多指標(biāo)篩選：結(jié)合菌株的生長速率、產(chǎn)物產(chǎn)量、耐受性、代謝特性等多個(gè)因素，綜合評(píng)估篩選出優(yōu)的菌株。此方法常結(jié)合高通量自動(dòng)化平臺(tái)進(jìn)行操作，能夠大規(guī)模、高效率地篩選。
8.自動(dòng)化平臺(tái)的應(yīng)用
高通量篩選系統(tǒng)通常配備自動(dòng)化平臺(tái)，這些平臺(tái)能夠自動(dòng)化處理樣品、培養(yǎng)、檢測和分析過程。例如，結(jié)合液體處理機(jī)器人和自動(dòng)化顯微鏡，能夠在短時(shí)間內(nèi)完成大量菌株的篩選。
9.數(shù)據(jù)分析與優(yōu)化
大數(shù)據(jù)分析：通過對(duì)高通量篩選數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)和機(jī)器學(xué)習(xí)分析，進(jìn)一步優(yōu)化篩選策略，提高菌株篩選的精確度和效率。
機(jī)器學(xué)習(xí)算法：利用機(jī)器學(xué)習(xí)算法分析培養(yǎng)過程中不同參數(shù)（如溫度、pH、營養(yǎng)成分等）對(duì)菌株表現(xiàn)的影響，自動(dòng)化優(yōu)化篩選策略。
通過這些方法，高通量菌種篩選優(yōu)化系統(tǒng)能夠迅速、有效地篩選出潛力的菌株，用于后續(xù)的研究或工業(yè)化應(yīng)用。
掃一掃，關(guān)注微信
丁鴻
咨詢電話